文章摘要:为挖掘适用于脱除有毒染料孔雀石绿（malachite green,MG）的DUF152家族漆酶，利用生物信息学方法在嗜热菌水生栖热菌中筛选候选酶TaLac，构建重组表达载体pET28a-TaLac，在大肠杆菌中进行过量表达和纯化，测定TaLac的酶学性质，探究TaLac对MG的脱色和脱毒能力。结果表明，TaLac具有DUF152家族保守铜原子结合位点，利用Ni亲和层析纯化得到高纯度的TaLac具有氧化2,6-二甲基苯酚（2,6-dimethylphenol,DMP）等漆酶底物的催化活性。以DMP为底物，该酶的最适pH为5.0，最适温度为60℃，K_m为0.74 mmol/L。此外，TaLac在50℃热处理4 h后，仍保留80%的原始活力；该酶可耐受高浓度的Mg²⁺、Ca²⁺、Mn²⁺、Zn²⁺和Ba²⁺等金属离子。TaLac可于3 h内使50 mg/L MG完全脱色，并彻底消除MG对玉米萌发的毒害作用。因此，TaLac是具有活性的DUF152家族漆酶，具有良好的热稳定性，可高效催化MG的脱色与脱毒。

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